1、蜘蛛通过交配繁殖。在交配前，雄蛛织一精网，从生殖孔产一滴含精子的液体到精网上，然后把精子吸入触肢器内。有的在交配时有求偶动作，如狼蛛和跳蛛挥动其须肢。多数雄蛛在交配时用左须肢插入雌蛛生殖板上的左侧开孔，右肢插入右侧孔。精子入生殖板后，移入与输卵管相通的受精囊，卵通过输卵管至生殖孔排出的过程中即受精。
2、有的雄蛛于交配后将交接器再充以精液，并与同一雌蛛再次交配。交配后，有些种类的雄蛛在雌蛛生殖板上涂一种分泌物（生殖栓），阻止雌蛛再交配。有的雄蛛在交配后为雌蛛所食，但这种情况不常见。黑寡妇雄蛛交配后数日死亡，偶因交配后太衰弱被雌蛛捕食。
3、产卵前，雌蛛先纺丝做“产褥”，产出卵，以贮存的精子使卵受精，再在卵块上纺一层丝。把两层丝膜的边连在一起，通常再用一层丝整个包起来，形成一个卵袋。每只雌蛛产卵袋1～15个不等，每个卵袋内含卵少则几个，最多达3000个，多数是几十个。卵袋附在网上（结网蜘蛛），或产在石下、叶面上。有的母蛛守护卵袋，如蟹蛛爬伏在卵袋上，遇到危险也不离开。
4、也有随身携带卵袋的，狼蛛带在腹部后端的纺器上，幽灵蛛科用螯肢衔在口端，盗蛛衔住后放在胸板下方。孵出卵壳的幼蛛仍在卵袋内停留数天，并在袋内蜕1～2次皮。狼蛛的幼蛛离开卵袋后，均爬到母蛛腹部的背面，由母蛛带着游猎数天后，才独立生活。幼蛛在成熟前共蜕皮4～15次。蜘蛛的世代可多达1年6代，也有的1年1代，少数种类为数年1代。寿命一般为几个月到1至2年，少数有长达20至30年的。