1、有人认为蒙娜丽莎的原型可能是一位名叫伊莎贝拉的妙龄少女，据说她相貌娇美、体态丰盈，特别适合当模特儿。美中不足的是她的牙齿不仅黄黑，而且牙缝很宽，所以伊莎贝拉总不敢对着别人咧嘴笑。她万万没想到自己极力控制的笑容，在达?芬奇的笔下成为经典，使无数人为之倾倒。
2、有人认为蒙娜丽莎的原型是有着“悍妇”之称的意大利传奇女子斯福尔扎。斯福尔扎是米兰公爵的私生女，不仅长得漂亮，而且还非常勇敢。据考证，克雷迪所画的25岁的斯福尔扎，其傲然的神态、双手的摆法与神秘的笑容，与达?芬奇画的蒙娜丽莎如出一辙。研究人员在对比画中人物的五官结构后，更确信蒙娜丽莎就是斯福尔扎。
3、有人认为蒙娜丽莎其实是达?芬奇的一幅自画像。假如在计算机上把蒙娜丽莎的像与达?芬奇的一幅自画像重叠在一起的话，会发现两幅像的面部如出一辙。但反对者表示，这个结果只不过是同一个画家采用同一种画风造成的。