1、意思不同。做，使用范围非常广泛，由没有到存在之间的过程；做就是造，产生这个东西的意思—做生意、做饭、做工、做鬼脸等。作，最早见于甲骨文，其本义为开始治卜龟，《仪礼》有“ト人坐作龟”之语，此字正是ト人用刀刮削、钻刻龟甲，然后灼烧，视其裂兆进行占卜之意。引申指制造、起始、兴起、发作、作为、写作等。
2、语义内容不同。“作”表示的动作性不强，意义比较抽象、泛化。如：作案、作保、作弊、作恶、作风、作梗、作价、作脸、作数、作速、作为、作伪、作用、作证、作准(作数)、炒作、合作、协作、运作、恶作剧。“做”表示的动作性强，意义比较具体、实在。如：做饭、做菜、做鬼脸、做家务、做手势、做姿势、做游戏、做针线。
3、语法特征不同。宾语是双音节动词，多用“作”，在这种情况下，宾语成为名物化的动名词，“作”的动词性已经虚化；如：作报告、作测试、作比较、作补充、作变动、作处理、作点拨、作调查、作斗争、作分析、作贡献、作回应、作介绍。宾语是双音节名词，多用“做”，表示做某件事或某方面的事。如：做工程、做功课、做记号、做家务、做课题、做事情、做事业、做物业、做项目、做学问、做业务。至于常用的“作出”一语，用法与前者大体相同。