1、准备好一个能装2-5斤水的玻璃瓶和一双筷子，用开水消毒后备用。
2、用水壶装上干净水（按一件红茶菌菌种用一斤水的比例计算）然后用干净纱布包一点茶叶、包一点白糖（任何茶叶均可，红茶更好，掌握茶的浓度比平时喝的茶水要淡一些，有一点颜色即可；一般按一斤水放2.5克左右的茶叶、一两左右的白糖，掌握甜度不宜太淡，也不宜太甜，可口为佳。茶叶、白糖分别用干净的纱布包好）。将包好的茶叶、白糖放入水壶中，再将水烧开，直到白糖完全熔化在水中。
3、将烧开的茶糖水离火降温，等茶糖水降至40℃以下时，取出包茶叶、白糖的纱布袋，将茶糖水倒入玻璃瓶中，不能倒满，要留点空隙，以利空气流通。
4、将红茶菌菌种（包括菌母和菌液）全部倒入上述玻璃瓶中，然后用干净纱布盖住瓶口并用绳子扎好，放在光线好的地方，以便于观察，尽量不要摇动。温度在25-30℃之间，4天左右就成；温度在15-25℃之间，6天左右就成；15℃以下8天左右就成。检验红茶菌是否成功的最好办法是：只要培养的新红茶菌液面上开始长有一层透明的胶状质皮膜，就算成功。当老的菌种变黄发黑后，可丢弃它，以便让新菌种生长更快。
5、当你培养的红茶菌液面变厚增多时，按照上述方法分成多块，移至其他玻璃瓶中去，加上茶糖水，让其继续发酵。只要你制作中掌握得法，注意一切培菌用具都用开水消毒，不染油盐酒，一件红茶菌菌种就可世代相传。
6、红茶菌培养成功后就可直接饮用，想饮用时，就将培养成功的红茶菌液倒入口杯中或碗中，如同平时喝茶，想喝多少就倒多少，不受限制，一天可喝无数次。当你培养的红茶菌液因时间长了变酸时，可随时加入白糖水，调到你认为酸甜可口时为止。
7、红茶菌在世界各地一年四季都可培植。